1958년 일본 시즈오카현에서 태어났으며 본명은 우스이 요시히토(臼井義人)이다. 1977년에 사이타마 현립 가스카베 공업 고등학교를 졸업한 이후 아르바이트를 하면서 디자인 전문 학교를 다녔으나 중퇴, 이후 1979년에 광고 관련 회사에 입사하였다. 1987년에 「다라쿠야 스토어 이야기」가 후타바샤 주간 위클리 만화 액션 신인상 가작에 입상하면서 만화가로 데뷔, 1990년 8월에 그의 대표작인 「크레용 신짱」의 연재를 시작하였다. 우리나라에서는 「짱구는 못말려」라는 제목으로 만화와 애니메이션이 소개되었다. 주인공인 말썽쟁이 신짱(짱구)은 엉뚱하지만 밉지 않은 어린이 캐릭터로, 애니메이션 등 여러 컨텐츠로 제작되어 우리나라를 비롯한 여러 나라 사람들의 사랑을 받고 있다.

2009년 9월 16일 우스이 요시토의 실종소식이 알려졌다. 9월 11일에 군마현으로 등산을 간다는 전화 이후로 연락이 되지 않아 다음 날 그의 가족이 경찰에 수색 요청을 하였고 일본 내 뉴스에서도 이 소식이 대대적으로 전파를 탔다. 이후 사흘 뒤 우스이 요시토로 추정되는 시신이 발견되었고 실족사한 것으로 마무리되었다. 갑작스러운 사고에 그를 사랑한 많은 팬들이 놀라고 슬퍼하였다.